马尾松NAC转录因子基因PmNAC8的克隆及表达分析

作者：镐青青; 姚圣; 刘佳禾; 陈佩珍; 张梦洋; 季孔庶^*

来源：生物技术通报, 2022, 38(04): 202-216.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2021-0830

• 马尾松
• NAC
• 密码子偏性
• 亚细胞定位
• 非生物胁迫
• 启动子

NAC(NAM，ATAF1/2，CUC2)家族基因参与调控植物生长发育、响应非生物胁迫及激素信号转导。研究马尾松中NAC转录因子在非生物胁迫中的应答，为阐明基因功能提供理论依据。以马尾松(Pinus massoniana)为试验材料，通过RT-PCR及RACE技术克隆一个NAC家族基因，并对其进行生物信息学分析。运用qRT-PCR检测其组织表达特性及对逆境胁迫的响应情况；以基因组DNA为模板，运用染色体步移(genome walking)技术克隆该基因上游启动子序列；通过农杆菌注射本氏烟草(Nicotiana benthamiana)，观察其亚细胞定位。该基因全长1 726 bp，开放阅读框为1 209 bp，编码402个氨基酸，将其命名为PmNAC8，GenBank登录号为MZ291447；亚细胞定位结果显示，该基因定位于细胞核；其密码子使用偏性较弱，偏好使用A/T结尾的密码子，且烟草与酵母更适合作为PmNAC8的异源表达受体；qRT-PCR显示PmNAC8在根部表达量最高，且受机械损伤及植物激素GA、ABA的诱导；克隆获得PmNAC8上游1 492 bp的启动子区域，含有多个胁迫诱导元件、赤霉素调控元件和光响应元件。PmNAC8参与多种逆境胁迫，可能在赤霉素信号途径中发挥重要作用。

• 单位
  南方现代林业协同创新中心; 南京林业大学