当归苯丙氨酸解氨酶基因原核表达载体的构建

作者：杨雪; 王引权; 雒军; 杨彩霞

来源：甘肃中医药大学学报, 2018, 35(03): 1-4.

DOI：10.16841/j.issn1003-8450.2018.03.01

• 当归
• 苯丙氨酸解氨酶基因
• 载体构建
• 原核表达

目的构建当归苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因原核表达载体,为重组蛋白的异源表达奠定基础。方法以PAL基因的全长c DNA序列为模板,PCR扩增得到PAL基因的开放阅读框序列,利用双酶切、酶连技术构建原核表达载体pGEX-4T-3-PAL,转化大肠杆菌(E.coli)BL21(DE3)感受态细胞,筛选阳性克隆菌株。结果利用传统的酶切和连接的方法成功构建了PAL基因的原核表达载体,并筛选得到阳性大肠杆菌表达菌。结论初步证明传统的酶切和连接技术能够运用于PAL基因原核表达载体的构建,获得的原核表达菌株用于下一步PAL蛋白的表达研究。

• 单位
  甘肃中医药大学