1,25-二羟基维生素D3通过下调葡萄糖转运蛋白-1表达抑制膀胱癌细胞增殖

作者：周舰; 张朝阳^*; 程耿; 杨军; 张景宇; 戚晓红

来源：重庆医科大学学报, 2022, 47(06): 693-699.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.003043

• 1,25-二羟基维生素D3
• 膀胱癌
• 葡萄糖转运蛋白-1
• 糖酵解
• 增殖

目的：研究 1,25-二羟基维生素 D3(1,25-(OH)2-VitD3)对膀胱癌细胞增殖的影响，并探讨其作用机制。方法：体外培养膀胱癌细胞 T24,MTT 法检测不同浓度 1,25-(OH)2-VitD3对细胞活力的影响，并筛选 1,25-(OH)2-VitD3干预细胞的最佳时间及半数抑制浓度。将细胞分为 4 组：对照组、葡萄糖转运蛋白-1(glucose transporter-1,GLUT1)抑制组、1,25-(OH)2-VitD3组、1,25-(OH)2-VitD3+GLUT1 抑制组。采用 Hoechst 33258 染色观察各组细胞形态变化；试剂盒检测细胞内葡萄糖摄取、三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)产生及乳酸形成水平；Real-time PCR 及 Western blot 检测 GLUT1、己糖激酶 2(hexokinase 2,HK2)、6-磷酸果糖-2-激酶/果糖-2,6-二磷酸酶 3(6-phosphofructo-2-kinase/fructose-2,6-biphosphatase 3,PFKFP3)、丙酮酸激酶同工酶 2(pyruvate kinase isozyme type M2,PKM2)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase A,LDHA)和低氧诱导因子 1α(hypoxiainducible factor-1α,HIF-1α)mRNA 和蛋白表达水平。结果：1,25-(OH)2-VitD3可降低 T24 细胞增殖能力，且呈剂量依赖性。1,25-(OH)2-VitD3组、GLUT1 抑制组及1,25-(OH)2-VitD3+GLUT1 抑制组细胞凋亡水平高于对照组，而 GLUT1、HK2、PFKFP3、PKM2、LDHA 和 HIF-1α mRNA 及蛋白表达水平明显低于对照组。与 GLUT1 抑制组比较，1,25-(OH)2-VitD3+GLUT1 抑制组GLUT1、HK2、PFKFP3、PKM2、LDHA 和 HIF-1α mRNA(均 P=0.000)和蛋白(均 P=0.000)表达水平明显降低。结论：1,25-(OH)2-VitD3可抑制膀胱癌细胞增殖，诱导细胞凋亡，其作用机制可能与下调 GLUT1 表达抑制细胞糖酵解过程有关。

• 单位
  武汉大学