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摘要
目的 通过检测染矽尘大鼠肺组织和A549细胞中微RNA-29b-3p(miRNA-29b-3p)和微RNA-34c-3p(miRNA-34c-3p)的表达水平,探讨miRNA-29b-3p和miRNA-34c-3p在肺纤维化进程中的作用。方法 SPF级雄性Wistar大鼠60只,按体重随机分为对照组和二氧化硅(SiO2)染尘组,每组30只,用一次性非暴露式气管滴注法灌注SiO2染尘组大鼠1 ml SiO2悬浊液,对照组大鼠相同方法气管内注入1 ml灭菌生理盐水。于染尘后1、7、14、21、28 d两组分别采集6只大鼠肺组织,其中3只大鼠取出肺组织进行病理学观察,另外3只采用miRNA微阵列芯片技术筛选肺组织中差异表达的miRNA。在体外细胞水平中培养A549细胞,分为对照组、SiO2刺激组和TGF-β1刺激组,在处理后的12、24和48 h收取细胞,通过荧光定量PCR(qRT-PCR)方法验证miRNA-29b-3p和miRNA-34c-3p在各组大鼠肺组织和A549细胞中的表达水平,对miRNA-29b-3p和miRNA-34c-3p进行靶基因预测并进行GO富集分析和KEGG通路分析。结果 对照组大鼠体重增长速度较SiO2染尘组大鼠明显；与对照组比较,SiO2染尘组大鼠的肺脏质量和肺系数明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组大鼠肺组织21、28 d炎症反应较1、7、14 d明显减轻,SiO2染尘组大鼠肺组织有持续性炎性细胞浸润；对照组大鼠肺组织21、28 d有少量胶原分布,SiO2染尘组大鼠肺组织21 d后开始出现大量胶原纤维沉积。与对照组比较,SiO2染尘组中miRNA-29b-3p和miRNA-34c-3p表达水平均明显下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。A549细胞在SiO2和人重组TGF-β1处理后,与对照组比较,24 h和48 h处理组中miRNA-29b-3p和miRNA-34c-3p表达水平均明显下调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 大鼠肺组织和A549细胞中miRNA-29b-3p和miRNA-34c-3p的下调可能与早期矽肺的发生发展有关,有望成为早期矽肺诊断以及预后的指标。
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