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摘要
基于超高效液相色谱-串联质谱系统建立食品中腰果过敏原的定量检测方法。腰果经提取、胰蛋白酶酶解、净化后，经Easy-nLC 1000纳升液相色谱分离，随后进入四极杆-静电场轨道离子阱高分辨质谱以全扫描模式进行数据采集，使用ProteinPilot软件结合Uniprot蛋白数据库对样品扫描结果进行分析，并基于基本局部比对搜索工具(BLAST)验证肽段特异性，最终筛选出6条腰果特异性肽段，利用超高效液相色谱-三重四极杆质谱系统的多反应监测模式对实际样品进行检测。结果表明，该方法在0.005～10 mg/mL范围内线性关系良好，R2均大于0.99，固体基质中定量限为2.5～5 mg/kg，饮料基质中定量限为0.005～0.01 mg/mL，平均回收率在82.5%～109.9%之间，相对标准偏差不大于8.9%。该方法灵敏度高、特异性好，可用于饼干、面包、蛋糕、桃酥、巧克力和饮料6种食品基质中的腰果过敏原检测。
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单位河北省食品检验研究院; 河北科技大学; 石家庄学院
