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摘要
目的 探讨氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)导致的视网膜损伤是否与Toll样受体-4(TLR-4)/MyD88通路激活和活化小胶质细胞使其极化为M1表型相关。方法 雄性C57BL/6小鼠分为两组，实验组小鼠视网膜下注射1μL ox-LDL,对照组小鼠注射等体积的磷酸盐缓冲液(PBS);2周后，采用免疫荧光染色检测视网膜小胶质细胞的离子钙结合适配器分子1(Iba-1)、iNOS的表达，TUNEL染色检测光感受器细胞凋亡，OCT检测视网膜外核层(ONL)和内核层(INL)厚度，ERG检测视网膜功能，qPCR检测视网膜Iba-1、TLR-4和MyD88的mRNA和蛋白表达。体外实验使用ARPE-19细胞，ox-LDL组细胞用100 mg·L-1 ox-LDL处理24 h, PBS组细胞使用等体积的PBS处理24 h; TUNEL染色检测细胞凋亡，Western blot和qPCR检测细胞TLR-4和MyD88的mRNA和蛋白表达。结果 qPCR和Western blot检测结果均显示，与对照组相比，实验组小鼠视网膜中TLR-4、MyD88、Iba-1的mRNA和蛋白表达水平均升高(均为P<0.05);与PBS组相比，ox-LDL组ARPE-19细胞中TLR-4、MyD88的mRNA和蛋白表达水平均升高(均为P<0.01)。免疫荧光染色结果显示，与对照组相比，实验组小鼠视网膜中的Iba-1、iNOS阳性细胞数均显著增加。TUNEL染色结果显示，与对照组相比，实验组小鼠视网膜中TUNEL染色阳性细胞数增加；与PBS组相比，ox-LDL组ARPE-19细胞中TUNEL染色阳性细胞数增加。ERG检测结果显示，实验组小鼠视网膜的a波和b波振幅均较对照组降低(均为P<0.001)。OCT检测结果显示，与对照组相比，实验组小鼠视网膜的ONL/INL比值下降(P<0.01)。结论 ox-LDL会引起视网膜损伤，其机制可能与激活TLR-4/MyD88通路，并且使小胶质细胞活化并极化为M1表型有关。
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