一种快速大量纯化骨骼肌Ryanodine受体的方法

作者：韩红梅; 韦日生; 尹长城

来源：中国生物化学与分子生物学报, 2006, 22(9): 755-760.

DOI：10.3969/j.issn.1007-7626.2006.09.011

• ryanodine受体1(RyR1)
• 肝素(heparin
• HP)层析
• 羟基磷灰石(hydroxyapatite
• HA)层析
• 电子显微镜观察

Ryanodine受体1(RyR1)在骨骼肌细胞的兴奋-收缩偶联过程中扮演重要角色,是肌质网快速释放Ca2+的通道.RyR1的结构研究需要大量的且纯度很高的蛋白.目前,文献中的方法不能一次性得到大量的纯化蛋白,因而不能满足结构研究的需要.通过运用肝素(heparin,HP)层析与羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)层析,可以在1 d内纯化获得毫克级RyR1.SDS-PAGE显示,RyR1纯度达95%以上.在透射电子显微镜下观察到RyR1是一个正方形的结构,形态类似儿童玩具风车.这些结果表明,该纯化方法获得的RyR1不仅纯度高而且结构完整.

• 单位
  北京大学