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摘要
过氧化氢酶(catalase, CAT)是抗氧化酶体系的主要成员，在维持机体氧化还原平衡、抵御病原感染过程中具有重要作用。为研究CAT基因在软体动物应答病原胁迫过程中的作用，实验采用RACE技术通过克隆和序列拼接获得了缢蛏CAT基因的全长cDNA序列，并命名为ScCAT。ScCAT基因全长为2 840 bp，编码508个氨基酸。序列分析显示，Sc CAT蛋白含有1个CAT核心结构域(25～410),1个保守的酶活性位点(61FNRERIPERVVHAKGAGA78)和1个亚铁血红素结合位点(351RLFSYPDTH359)。多序列比对和系统进化树分析结果显示，Sc CAT属于CAT基因家族，且与无脊椎动物文蛤的亲缘关系最近。组织分布显示，ScCAT在所有检测的组织中均能表达，其中在肝胰腺中表达量最高，鳃中次之，血细胞中的表达量最低，分别为闭壳肌的85.67倍、50.09倍和0.76倍。在副溶血弧菌胁迫下，ScCAT在缢蛏肝胰腺中的表达明显上升，且在12 h达到最高值，为对照组的3.56倍；酶活性测定结果显示，副溶血弧菌胁迫显著诱导缢蛏肝胰腺和鳃组织中的CAT活性。为进一步探讨Sc CAT的蛋白功能，实验构建Sc CAT原核表达质粒，通过诱导、纯化后发现Sc CAT重组蛋白具有显著的CAT酶活性。研究表明，Sc CAT作为一类重要的抗氧化酶参与了缢蛏体内的免疫应答。
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