呼吸道合胞病毒A与B亚型多重荧光PCR检测方法的建立及应用

作者：刘文宽; 周荣; 陈德晖; 檀卫平; 邱淑燕; 许多; 李潇

来源：临床检验杂志, 2016, 34(10): 751-754.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2016.10.11

• 呼吸道合胞病毒
• 呼吸道合胞病毒A亚型
• 呼吸道合胞病毒B亚型
• 荧光定量PCR
• 多重检测

目的建立一种新的呼吸道合胞病毒(RSV)分型检测方法,用于快速检测和监测。方法针对RSV G基因设计引物、探针,并引入人β-actin基因(ACTB)作为内参质控,建立RSV-A、RSV-B多重荧光PCR检测方法。使用多种常用呼吸道病原体及体外转录RNA产物考核其特异性和灵敏度。并对2015年1月至12月广州两家医院的儿童急性呼吸道感染患者进行检测。结果所建立的多重检测方法未见非特异性反应。RSV-A、RSV-B和ACTB分别可检测低至4、8和12 copies/μL的RNA模板,且分别在101×1010copies/μL、1001×1010copies/μL和1001×1010copies/μL时具备良好的线性关系,线性相关系数r2均大于0.99。儿童急性呼吸道感染患者监测中,RSV-A为期间优势亚型。结论本研究所建立的RSV-A、RSV-B多重荧光PCR检测方法,具有较好的特异性、灵敏度、可操作性,可用于相关研究。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院; 呼吸疾病国家重点实验室; 广州医科大学附属第一医院