不同保存时间的血浆及血清中外泌体生物学特性的对比

作者：王婷婷; 韩影; 高芳芳; 叶磊; 张育军^*

来源：医学研究生学报, 2019, 32(07): 705-709.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2019.07.007

• 外泌体
• 血清
• 血浆
• 保存

目的外泌体对于疾病的诊断和治疗具有不可比拟的优势,但其保存方法、保存时间、保存效果的评估研究较少。文章旨在观察不同保存时间的血浆及血清中外泌体的大小、密度、形态及阳性蛋白表达有无改变。方法使用Exoquick试剂盒分别提取新鲜及保存在-80℃冰箱1年、3年、5年的正常人血浆及血清中的外泌体;使用纳米粒度颗粒跟踪分析仪对提取的外泌体进行粒径分析;使用透射电镜对提取的外泌体的形态进行观察;Western blot检测外泌体标志物TSG101和CD63的表达改变。结果保存时间达3年的血浆中的外泌体粒径较大(30～200 nm),血清较血浆中外泌体数量略高;电镜下不同保存时间的血浆及血清中外泌体形态变化不明显;随着保存时间的延长,血浆及血清中外泌体蛋白TSG101及CD63含量发生降低,其中CD63降低尤其明显。结论不同保存时间的血浆及血清中外泌体粒径及形态变化差异不大,但其内含蛋白标志物随着时间延长发生明显减少,因此进行外泌体蛋白的相关研究时推荐新鲜提取立即实验。

• 单位
  中心实验室; 北京大学人民医院