携带OPCML基因的慢病毒表达质粒的构建

作者：姚德生; 李力; KennethGarson; BarbaraC.Vanderhyden

来源：现代妇产科进展, 2006, (07): 518-521+561.

DOI：10.13283/j.cnki.xdfckjz.2006.07.010

• 基因
• OPCML
• 卵巢肿瘤
• 慢病毒载体
• 基因转移 Genes OPCML
• Ovarian neoplasms
• Lentiviral vector
• Gene transfer

目的:建立携带和表达OPCML基因的慢病毒(lentiviral viruses,LV)表达质粒。方法:用内切酶将OPCML基因从已构建的表达质粒pcDNA3-OPCML上切下,插入慢病毒载体pWPI-GFP中,构建慢病毒表达质粒pWPI-OPCML,通过酶切、测序和检测验证OPCML蛋白后,将pWPI-OPCML、pCMV-dR8.74和pMDG共转染包装细胞293T,获得重组慢病毒,再感染靶细胞A2780,通过检测标志蛋白-绿色荧光蛋白(GFP)和目的蛋白OPCML进一步验证pWPI-OPCML在细胞中OPCML的表达。结果:(1)pWPI-OPCML中携有正确的OPCML基因,并能在人类...

• 单位
  广西医科大学附属肿瘤医院; 加拿大渥太华大学