天王补心丹加减改善PCPA失眠大鼠Trx系统氧化损伤的机制探讨

作者：谢光璟; 黄攀攀; 王平^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2019, 25(06): 32-38.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20190637

• 失眠
• 天王补心丹
• 视交叉上核(SCN)
• 氧化应激
• 硫氧还蛋白系统

目的:探讨天王补心丹加减对对氯苯丙氨酸(PCPA)所致失眠大鼠硫氧还蛋白(Trx)系统抗氧化损伤的作用机制。方法:60只雄性SD大鼠随机分为空白组、造模组。造模组以腹腔注射PCPA造模,注射剂量为150 mg·kg-1,间断注射7 d。造模成功后,依次分为模型组(等容生理盐水),天王补心丹加减低、中、高剂量组(8. 8,17. 6,35. 2 g·kg-1·d-1)和艾司唑仑组(0. 1 mg·kg-1·d-1),每组10只。自发活动视频分析系统监测大鼠昼夜活动节律,透射电镜观察大鼠下丘脑视交叉上核(SCN)形态及细胞器完整性,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平,免疫荧光(IF)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测SCN细胞硫氧环蛋白2(Trx2),硫氧环蛋白还原酶2(TrxR2)的表达。结果:与空白组比较,模型组大鼠活动时间显著增加(P <0. 01),昼夜节律紊乱,线粒体嵴断裂,数量减少,排列紊乱,伴空泡化和髓鞘样变,SOD,GSH-Px活性下降且MDA含量显著升高(P <0. 01),Trx2的蛋白表达量显著降低(P <0. 01),TrxR2蛋白表达量显著增加(P <0. 01);与模型组比较,天王补心丹中、高剂量组能够明显改善大鼠昼夜节律紊乱,减少活动时间(P <0. 01),同时线粒体水肿程度减轻,部分嵴尚完整,SOD,GSH-Px活性升高,MDA水平明显降低(P <0. 05,P <0. 01),Trx2蛋白表达明显升高,TrxR2蛋白表达明显下降(P <0. 05)。结论:天王补心丹加减对失眠模型大鼠的改善作用与调控Trx抗氧化系统中Trx2与TrxR2的蛋白表达有关。

• 单位
  基础医学院; 湖北中医药大学