线虫fat-1基因的原核表达、纯化及其抗体的制备

作者:张鹏; 曹立雪; 陈宏; 马润林
来源:西北农林科技大学学报(自然科学版), 2007, 35(1): 24-28.
DOI:10.3321/j.issn:1671-9387.2007.01.005

摘要

通过RT-RCR得到线虫fat-1基因全长,将其N端亲水区克隆至原核表达载体pGEX-4T-2中,构建重组质粒pGEX-fat1-N,将其转化大肠杆菌,并进行诱导表达.对表达产物GST-fat1-N融合蛋白进行纯化,制备其抗体,并对抗体效价进行了检测.结果表明,线虫fat-1基因能在大肠杆菌中表达,制备的抗体能识别在原核表达系统内表达的GST-fat1-N融合蛋白,且效价很高,达到1:107.

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