微小RNA-K1-5p调控G1/S期相关基因的表达影响内皮细胞周期

作者：张静; 彭靖淇

来源：安徽医药, 2023, 27(01): 108-112.

• 内皮细胞
• 微小核糖核酸-K1-5p
• 细胞周期素依赖性激酶抑制剂4
• 细胞周期蛋白A/细胞周期素依赖性激酶2
• 细胞周期蛋白D2/细胞周期素依赖性激酶4
• 细胞周期
• 卡波西肉瘤

目的 探讨卡波西肉瘤（Kaposi′s sarcoma,KS）相关疱疹病毒（KSHV）编码的微小RNAs(miR)，如miR-K1-5p，对KS细胞周期的调控作用及其机制。方法 该研究进行于2020年1—12月，人脐静脉内皮细胞购自美国ScienCell。生物信息学软件预测miR-K1-5p的靶基因。双萤光素酶试验验证miR-K1-5p的靶基因[细胞周期素依赖性激酶抑制剂4(CDKN4)]。将miR-K1-5p模拟物转染后，行蛋白质印迹法（Western blotting）和q-PCR检测，分析G1/S期相关基因CDKN4、细胞周期蛋白A/细胞周期素依赖性激酶2(Cyclin A/CDK2)、细胞周期蛋白D2/细胞周期素依赖性激酶4(Cyclin D2/CDK4)的表达。碘化丙啶（PI）染色检测miR-K1-5p对内皮细胞（HUVECs）周期的影响。结果 miR-K1-5p靶向CDKN4(miR-K1-5p mimics+CDKN4-WT组、mimics NC+CDKN4-WT组、miR-K1-5p mimics+CDKN4-MUT组、mimics NC+CDKN4-MUT组萤光素酶活性分别为0.42±0.05、0.81±0.04、0.82±0.03、0.80±0.05)，负性调控CDKN4的表达（P<0.001），正性调控Cyclin A/CDK2和CyclinD2/CDK4的表达（P<0.05）。此外，miR-K1-5p可以加速细胞周期进程，促进G1/S期转换[S+G2期/G1+S+G2期：mimics组（23.37±0.29）%比mimics NC组（15.00±0.75）%,G1期：mimics组（76.63±0.28）%比mimics NC组（85.00±0.76）%,S期：mimics组（15.34±0.36）%比mimics NC(8.45±0.20)%,G2期：mimics组（8.02±0.17）%比mimics NC组（6.55±0.80）%]。结论 miR-K1-5p调控G1/S期相关基因的表达影响内皮细胞周期。

• 单位
  新疆医科大学附属中医医院