猪圆环病毒复合PCR检测方法的建立

作者：朱军莉; 余旭平; 时晗; 吴海波; 金俊杰; 何世成

来源：中国兽医科技, 2004, 34(02): 38-42.

DOI：10.3969/j.issn.1673-4696.2004.02.008

• 猪圆环病毒
• 聚合酶链式反应
• 流行病学调查

根据已发表的PCV 1和PCV 2全基因组序列 ,设计了 3条引物 ,组成PCV 2的特有引物对和PCV 1、PCV 2的共有引物对 ,分别扩增长度为 4 72bp和 339bp的片段。为验证PCR扩增的特异性 ,将 4 72bp的扩增产物纯化后 ,克隆到 pMD 18 T载体 ,转化大肠埃希氏菌TG1,对阳性克隆进行酶切及PCR鉴定 ,并测序。将该序列递交NCBI进行BLAST同源序列比较 ,发现它与美国、加拿大及我国台湾的PCV 2毒株核苷酸序列的同源性均在 99%以上 ,与PCV 1毒株的同源性为 86 %。结果显示 ,该方法最少可用于 3μg病料组织和 0 .75 pgDNA的PCV 2检出 ,具有很高的灵敏性。应用该PCR方法检测了浙江省和上海市 4 7份“猪高热综合征”病料 ,PCV 2感染阳性率为 36 .17% ,PCV 1单独感染阳性率为 34.0 4 %。

• 单位
  动物科学学院; 浙江大学; 生命科学学院; 东北农业大学