摘要
目的:建立罂粟壳的指纹图谱,并测定其中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱、那可丁等5个成分的含量。方法:采用高效液相色谱(HPLC)法。以Agilent ZORBAX Eclipse XDB-C18为色谱柱,以甲醇-庚烷磺酸钠溶液为流动相进行梯度洗脱,流速为1.0mL/min,检测波长为238 nm(罂粟碱)、216 nm(吗啡、可待因、那可丁、蒂巴因),柱温为20℃,进样量为10μL。使用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》建立15批罂粟壳药材样品的HPLC指纹图谱并进行相似度评价,结合混合对照品图谱确定共有峰;同法测定罂粟壳中吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱、那可丁等5个成分的含量。采用SPSS 19.0软件进行聚类分析。结果:15批罂粟壳药材样品中共有13个共有峰,相似度均大于0.99;共指认了5个色谱峰,分别为吗啡、可待因、蒂巴因、罂粟碱、那可丁。聚类分析结果显示,15批罂粟壳药材样品可聚为两类,S1~S7为聚为一类,S8~S15聚为一类,分属2个地市。吗啡等5个成分检测质量浓度的线性范围分别为10.21~102.10、10.43~104.30、1.54~30.70、2.36~47.28、2.32~57.90μg/mL(r均大于0.998);精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD均小于2%;平均加样回收率分别为99.46%(RSD=1.08%,n=6)、97.84%(RSD=1.55%,n=6)、91.10%(RSD=1.74%,n=6)、96.43%(RSD=1.25%,n=6)、94.82%(RSD=1.20%,n=6);含量分别为2.342 9~4.082 2、0.430 4~0.889 7、0.055 2~0.090 4、0.299 3~0.558 8、0.343 2~0.656 2 mg/g。结论:所建HPLC指纹图谱及含量测定方法简便可行、灵敏准确,结合聚类分析能较好地反映罂粟壳药材中化学成分的特征及内在质量;虽然不同地市产罂粟壳有区划特征,但质量基本稳定。
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