摘要

目的构建能够表达AFP和CTLA4融合蛋白的DNA疫苗并检测其诱导特异性CTL反应及抗产生AFP肿瘤的能力。方法利用RT-PCR从Hepa1-6细胞总RNA中克隆mAFP基因。连接mAFP基因和编码小鼠CTLA4膜外部分的基因构建质粒DNA疫苗。对此疫苗进行酶切、测序和表达鉴定。用pmAFP稳定转染EL-4细胞建立EL-4(mAFP)细胞系。以此DNA疫苗免疫小鼠,用ELISPOT检测免疫后小鼠脾脏细胞中产生IFN-γ的细胞频数。以EL-4(mAFP)肿瘤细胞攻击免疫后小鼠,观察肿瘤的生长情况。另外,对免疫的小鼠采血进行肝、肾功能检测。结果利用RT-PCR从Hepa1-6细胞总RNA中成功克隆...