重组Trx-ApoO融合蛋白的构建与表达(英文)

作者：吴陈璐; 赵水平; 于碧莲; 熊丹

来源：中南大学学报(医学版), 2011, (02): 116-120.

• 载脂蛋白O
• 基因克隆
• 融合蛋白
• 蛋白纯化 apolipoprotein O
• gene cloning
• fusion protein
• protein purification

目的:构建人载脂蛋白O(apolipoprotein O,ApoO)表达质粒,用pET原核表达系统制备重组抗原Trx-ApoO融合蛋白。方法:以人类肝脏cDNA文库为模板,聚合酶链反应(PCR)法扩增ApoODNA,将测序正确的目的基因片段插入质粒pET-32a( )相应位点构建重组质粒并转化E.coliBL21(DE3),经IPTG诱导表达、Ni-NTA亲和层析制备Trx-ApoO。通过琼脂糖凝胶电泳、DNA测序及十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定重组质粒及表达的Trx-ApoO融合蛋白的正确性。结果:PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳证实在SDS-PAGE上出现1条51...

• 单位
  湖南远泰生物技术有限公司; 中南大学湘雅二医院