菲牛蛭抗凝提取物活性成分的研究

作者：李阳; 顾福根; 郭桃桃; 卢天才; 许维岸; 韩宏岩^*

来源：中药材, 2021, 44(12): 2850-2855.

DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2021.12.021

• 水蛭
• 菲牛蛭
• 抗凝提取物
• 活性成分
• 蛋白质组

目的：全面了解菲牛蛭抗凝活性提取物蛋白质生物活性成分和功能。方法：比较了30%～80%饱和度硫酸铵沉淀法、20%～60%乙醇沉淀法和60%丙酮联合等电点沉淀法分离纯化菲牛蛭抗凝活性物质的方法；采用Nano LC-MS/MS结合生物信息学分析鉴定提取物的蛋白质成分；对提取物进行了体外抗凝溶栓和细胞毒性的功能研究。结果：3种方法抗凝回收率分别为83%、66%和64%。三种方法提取物冻干粉颜色均较浅，无强烈腥臭味。硫酸铵沉淀法得到的冻干粉完全水溶，乙醇和丙酮法有少量不溶。从提取物冻干粉中共鉴定出397种蛋白质，其中生物活性物质除了含有水蛭素，还含有多种生物活性蛋白；冻干粉能延长血浆复钙时间PRT、凝血酶时间TT和凝血酶原时间PT;有体外溶栓效果；不影响正常的星形胶质细胞增殖，可呈浓度依赖性抑制胶质瘤细胞的生长增殖。结论：该研究建立了充分提取活体菲牛蛭抗凝活性物质的方法，抗凝提取物中含有多种具有潜在药用价值的蛋白质成分。该研究对菲牛蛭的应用奠定了基础。

• 单位
  苏州大学; 广西复鑫益生物科技有限公司