Rad51基因沉默对铅诱导TK6细胞DNA双链断裂损伤修复的影响

作者：刘祥铨; 吴京颖; 林秀洁; 陈美芳

来源：职业卫生与应急救援, 2022, 40(01): 5-9.

DOI：10.16369/j.oher.issn.1007-1326.2022.01.002

• 醋酸铅
• 人淋巴母细胞
• TK6细胞
• DNA双链断裂
• 基因沉默
• Rad51基因
• 损伤修复

目的 研究Rad51基因沉默后对醋酸铅染毒致人淋巴母细胞（TK6细胞）DNA双链断裂损伤的修复作用的影响。方法 构建Rad51沉默慢病毒载体及阴性对照，感染对数期TK6细胞，荧光定量PCR和Western blot验证感染效果。运用480μmol/L的醋酸铅染毒TK6细胞24 h(Control组、shRNA-NC组和shRNA-Rad51组)，采用免疫荧光法检测TK6细胞的磷酸化组蛋白H2AX（γ-H2AX）的表达，Western Blot检测TK6细胞的Rad51、BRCA1、53BP1蛋白的表达。结果 shRNA-Rad51组的Rad51 mRNA表达水平和Rad51蛋白表达水平均低于Control组及shRNA-NC组（P <0.01）;shRNA-Rad51组的γ-H2AX阳性率为（27.48±1.66）%，与Control组的（14.77±1.21）%及shRNA-NC组的（14.04±1.31）%比较，差异均有统计学意义（P <0.01）;shRNA-Rad51组的BRCA1蛋白表达水平为（0.25±0.03），与Control组的（0.55±0.04）及shRNA-NC组的（0.51±0.04）比较，差异均有统计学意义（P <0.01）;shRNARad51组的53BP1蛋白表达水平为（3.24±0.27），与Control组的（2.01±0.19）及shRNA-NC组的（2.11±0.17）比较，差异均有统计学意义（P <0.01）。结论 Rad51基因沉默后，TK6细胞HR修复通路受抑制和NHEJ修复通路激活，TK6细胞对铅遗传毒性的敏感性增强。

• 单位
  厦门医学院; 福州市中医院; 福建省福州神经精神病防治院; 福州市疾病预防控制中心