人骨髓间充质干细胞诱导鼻咽癌上皮间质化的初步探讨

作者：蒋东辉; 黄博; 张月飞; 李祥勇; 周克元; 罗国庆

来源：中华肿瘤防治杂志, 2014, 21(23): 1851-1864.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2014.23.003

• 鼻咽癌
• 骨髓间充质干细胞
• 上皮间质转化
• 条件培养基

目的初步探讨人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cells,hbMSCs)条件培养基(conditioned medium,CM)在人鼻咽癌CNE1及CNE2细胞上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)中的影响。方法取第3代hbMSCs融合达70%80%时,换液培养24h后取其上清液(hbMSCs-CM);取对数生长期5×103CNE1及CNE2细胞,分别在普通培养液(对照组)和hbMSCs-CM的培养液(实验组)中培养。使用倒置相差显微镜下观察细胞形态学改变,蛋白质印迹法及q-PCR检测EMT相关蛋白及RNA变化。结果 hbMSCs-CM培养鼻咽癌细胞5d,CNE1和CNE2均观察到细胞间距离增宽,并且折光性强、多量单极或双极梭形状成纤维细胞样细胞,以CNE2细胞最为明显。q-PCR检测结果显示,与对照组相比,hbMSCs-CM培养组细胞上皮细胞标志基因mRNA的相对表达水平下调,差异有统计学意义,P值均<0.001;间质细胞标志基因mRNA相对表达水平上调,差异有统计学意义,P值均<0.001;EMT相关转录因子基因mRNA相对表达量上调,差异有统计学意义,P值均<0.001。蛋白质印迹法检测结果显示,hbMSCs-CM诱导CNE1及CNE2细胞发生EMT并呈一定浓度依赖性。当hbMSCs-CM浓度≥70%,上皮细胞标志蛋白相对表达水平显著下降,差异有统计学意义,P<0.05。当hbMSCs-CM浓度>50%时,CNE1和CNE2细胞间质细胞标志及转录因子蛋白相对表达水平上调,差异有统计学意义,P<0.05。结论 hbMSCs可改变鼻咽癌细胞形态,并下调细胞黏附蛋白及增加细胞间质蛋白水平,可能是参与鼻咽癌上皮间质转化过程的因素之一。

• 单位
  广东省教育厅; 广东医学院附属医院