Slfn5基因条件性敲除小鼠模型的构建

作者：李婧铱; 吕昌莲; 贾迪; 顾雪锋; 万国庆; 赵炜明^*

来源：哈尔滨医科大学学报, 2022, 56(06): 551-556.

DOI：10.20010/j.issn.1000-1905.2022.06.0551

• 基因敲除
• CRISPR/Cas9技术
• Schlafen家族成员-5

目的 应用CRISPR/Cas9技术构建Slfn5基因条件性敲除小鼠模型并进行初步表型鉴定，为Slfn5功能及机制研究提供动物模型。方法 根据Slfn5的基因结构，选择外显子3作为敲除区域(flox区域)。采用受精卵同源重组的方式，将针对Slfn5基因设计的gRNA(guide RNA)、Cas9 mRNA以及含有flox区域的同源重组质粒显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中并获得F0代小鼠。PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠与C57BL/6J野生型小鼠交配，获得F1代Slfn5 flox/+杂合子小鼠。此杂合子小鼠自交，得到F2代Slfn5flox/flox纯合子小鼠。最后，将F2代Slfn5flox/flox纯合子小鼠与Dppa3-Cre鼠杂交，得到flox纯合且Cre阳性小鼠即Slfn5敲除小鼠。结果 获得Slfn5敲除小鼠模型，PCR及测序鉴定为Slfn5基因条件性敲除小鼠。与野生型小鼠相比，Slfn5基因敲除的小鼠血常规中淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞数量明显增多(P<0.05)。结论 应用CRISPR/Cas9技术成功建立Slfn5基因敲除小鼠动物模型，为研究Slfn5在乳腺癌和免疫系统的生物学功能及作用机制奠定实验基础。

• 单位
  齐齐哈尔医学院; 基础医学院; 黑龙江中医药大学; 上海健康医学院