摘要
目的:对转录因子-4(TCF4)部分肽段进行原核融合表达,制备多克隆抗体。方法:构建TCF4的GST融合表达载体,表达后进行蛋白纯化,免疫家兔后获得抗血清;构建TCF4真核表达载体,Westernblot检测pcDNA3.1/TCF4转染的COS-7细胞。用地高辛标记的TCF4探针和抗TCF4的抗体检测人成骨样细胞Saos-2加载后细胞内TCF4表达水平的变化。结果:Westernblot显示抗体能特异性地与TCF4结合;细胞加载后,TCF4mRNA和蛋白表达均明显增加。结论:成功制备了抗TCF4多克隆抗体,并证实加载后TCF4在Saos-2中有高表达。
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单位第四军医大学