CYP17A1介导的DNA去甲基化与胶质瘤细胞增殖、侵袭和转移的关系

作者：李强; 朱司泉; 刘朋; 宋纯玉; 高勇; 张敬泉

来源：中华实验外科杂志, 2020, 37(12).

• CYP17A1
• 胶质瘤细胞
• 甲基化
• 增殖
• 侵袭
• 转移

目的探讨CYP17A1介导的DNA去甲基化与胶质瘤细胞增殖、侵袭和转移的关系。方法将2019年6月收集的组织细胞样本通过聚合酶链式反应(PCR)实验, 蛋白质印迹法(Western blot)实验对细胞中CYP17A1 Mrna及蛋白表达量进行测定;利用甲基化检测(MSP)法检测CYP17A1基因在的甲基化状态;通过噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞仪对细胞增殖情况进行测定;通过细胞侵袭实验对细胞侵袭及转移情况进行测定。计数资料使用χ2检验或Fisher精确概率法。结果模型组、实验组与正常组中CYP17A1基因mRNA的相对表达量差异有统计学意义(F=12.541, P<0.05)。实验组与癌模型组比较, CYP17A1基因mRNA的相对表达量显著下降, 差异有统计学意义(t=12.769, P<0.05);免疫组织化学检测CYP17A1蛋白的表达, 结果表明, CYP17 A1蛋白在胶质瘤中表达量(0.621±0.027)显著高于正常组(0.019±0.003), 差异有统计学意义(t=49.551, P<0.05);CYP17A1基因甲基化状态的分析结果表明, CYP17A1基因在正常细胞中未检测出, 在模型组中CYP17A1基因甲基化发生率为89.03%, 实验组中甲基化发生率为43.93%明显低于模型组, 差异有统计学意义(χ2=4.021, P<0.05);MTT生长曲线结果表明, DHEA结合TMZ预处理能显著抑制细胞增殖速率(P<0.05)。在平板克隆实验中, CYP17A1在模型组和实验组中克隆个数分别为(78.09±10.21)、(38.97±11.32)个, 且实验组中的克隆个数显著低于模型组, 差异有统计学意义(t=5.738, P<0.05);模型组的迁移能力明显高于对照组, 实验组细胞的侵袭率33.33%, 明显低于模型组的88.89%, 差异有统计学意义(χ2=5.844, P<0.05)。结论 CYP17A1诱导DNA去甲基化可抑制胶质瘤细胞的增殖、侵袭和转移。

• 单位
  上海市杨浦区中心医院