摘要
目的 探讨微小RNA-433-3p(miR-433-3p)对胰腺癌细胞增殖、侵袭、迁移的影响及其与滑蛋白(SMO)的靶向关系。方法 培养胰腺癌PANC-1细胞、人正常胰腺上皮细胞HPNE。将miR-NC、miR-433-3p mimics、si-NC、si-miR-433-3p、敲低空载Scramble、si-SMO、Vector、SMO过表达(OE-SMO)质粒分别转染至PANC-1细胞,设为miR-NC组、miR-433-3p组、si-NC组、si-miR-433-3p组、Scramble组、si-SMO组、Vector组及SMO组。将Vector、OE-SMO质粒分别转染至miR-433-3p组细胞,设为si-miR-433-3p+Scramble组、si-miR-433-3p+si-SMO组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力,荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞SMO基因mRNA及miR-433-3p表达水平,Western blot检测细胞SMO蛋白表达水平,TargetScan在线网站预测miR-433-3p与SMO结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证miR-433-3p与SMO的靶向关系。结果 PANC-1细胞SMO基因mRNA及其蛋白表达水平高于HPNE细胞,差异有统计学意义(P<0.05); PANC-1细胞miR-433-3p表达水平低于HPNE细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。下调miR-433-3p、上调SMO可促进细胞的增殖、侵袭及迁移,上调miR-433-3p、沉默SMO可抑制细胞的增殖、侵袭及迁移。下调SMO逆转了miR-433-3p低表达对细胞增殖、侵袭及迁移的促进作用。miR-433-3p可负性调控SMO表达。结论 miR-433-3p负性调控SMO抑制胰腺癌细胞的增殖、侵袭及迁移。
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单位四川省南充市中心医院