骨髓基质细胞体外诱导分化移植治疗大鼠脊髓损伤的研究

作者：虞海流; 茅祖斌; 蒋赞利; 郭开今; 周开锋; 张立峰

来源：现代医学, 2009, (02): 110-114.

• 骨髓基质细胞
• 诱导分化
• 移植
• 脊髓损伤
• 大鼠

目的探讨大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)在体外由碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、表皮生长因子(EGF)、全反式维甲酸(RA)联合诱导下分化成的神经细胞样细胞移植治疗大鼠脊髓损伤的可行性。方法采用出生4周SD大鼠的全骨髓细胞进行培养,利用bFGF+EGF+RA在体外诱导BMSCs向神经细胞样细胞分化。在倒置相差显微镜下每日观察、记录BMSCs的诱导分化情况,并应用免疫组化技术对细胞进行兔抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)单克隆抗体鉴定。实验动物分为3组:细胞移植组(A组)、模型对照组(B组)、正常对照组(C组)。A、B组采用改良A llen s法建立大鼠急性脊髓损伤模型。A组在造模后立即将诱导后的BMSCs悬液多点缓慢注入到损伤节段的头侧和尾侧,B组同法注射等量磷酸盐缓冲液。C组不造模,于相同部位注射等量磷酸盐缓冲液。于伤后1~5周,按照BBB法观察脊髓神经功能恢复情况并处死动物取材,用HE染色观察脊髓病理变化。结果诱导7 d后有部分细胞具备神经元样细胞形态,胞体呈锥形或圆形,有较长单极或多极的突起,有NSE阳性细胞表达;细胞移植后1~5周,A、B组动物运动功能均有不同程度恢复,但B组恢复较慢,BBB评分差异有统计学意义(P<0.05);组织形态学观察示A组损伤脊髓恢复较好。结论bFGF、EGF和RA可以联合诱导BMSCs向神经干细胞分化,并可调控神经元分化,将其移植于大鼠脊髓损伤区,可促进脊髓损伤的恢复。

• 单位
  东南大学附属中大医院; 江苏省苏北人民医院