晚期糖基化终末产物通过Wnt/β-catenin信号通路调控足细胞自噬和迁移

作者：张利; 刘建璟; 孙林春^*

来源：临床肾脏病杂志, 2018, 18(12): 778-783.

• 糖基化终末产物
• 足细胞
• Wnt信号通路
• 自噬
• 迁移

目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导Wnt/β-catenin信号通路活化对足细胞自噬和迁移的影响。方法将小鼠永生化肾足细胞系分为牛血清白蛋白组(100mg/L BSA)、糖基化终末产物组(100 mg/L BSA-AGEs)和糖基化终末产物+DKK-1组(100mg/L BSA-AGEs+100 DKK-1 mg/L),以未加干涉的正常足细胞为对照组。Western blot检测足细胞β-catenin蛋白、自噬膜蛋白微管相关蛋白轻链3-II(LC3-Ⅱ)以及自噬底物p62蛋白表达水平,免疫荧光观察足细胞自噬情况,ELISA检测细胞上清液中Nephrin蛋白含量,划痕试验检测足细胞迁移能力。用AGEs和AGEs+RAGE(糖基化终末产物受体)中和抗体处理足细胞系,Western blot检测足细胞β-catenin蛋白的表达。结果与对照组相比,AGEs组p-β-catenin、p62表达升高(P<0.05),LC3-Ⅱ表达降低(P<0.05)。AGEs+DKK-1组p-β-catenin、p62蛋白表达较AGEs组降低,LC3-Ⅱ表达升高(P<0.05),但与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。BSA组各指标与对照组均无显著性差异(P>0.05)。免疫荧光检测发现AGEs组足细胞中LC3荧光强度较对照组明显减弱,AGEs+DKK-1组较AGEs组LC3荧光强度增强,BSA组与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。AGEs组细胞培养上清中Nephrin含量较对照组明显降低(P<0.05),AGEs+DKK-1组较AGEs组升高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05),BSA组与对照组差异无显著性(P>0.05)。与对照组相比,AGEs组足细胞迁移能力降低(P<0.05),AGEs+DKK-1组、BSA组与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。AGEs+RAGE中和抗体处理的足细胞β-catenin蛋白水平较AGEs组显著降低(P<0.05)。结论 AGEs通过RAGE激活Wnt/β-catenin信号通路,抑制足细胞自噬和迁移能力,可能是糖尿病患者足细胞损伤机制之一,在糖尿病肾病的发生和进展中发挥重要调控作用。

• 单位
  南京医科大学; 南京中医药大学; 江苏省中医药研究院