Notch1通过非经典的Notch信号通路调节胰腺星形细胞的活化

作者：宋海岩^*; 周志新; 张玉祥^*

来源：中国病理生理杂志, 2020, 36(02): 260-267.

DOI：10.3969/j.issn.1000-4718.2020.02.011

• Notch信号通路
• 胰腺导管腺癌
• 胰腺星形细胞

目的:探讨Notch1在胰腺星形细胞(pancreatic stellate cells,PSCs)活化中的作用。方法:利用免疫组织化学法与免疫荧光双标法检测Notch1在人胰腺导管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma,PDAC)组织的表达情况;原代分离培养小鼠PSCs,利用油红O染色、Western blot及RT-qPCR法对其进行鉴定,并利用Western blot及RT-qPCR检测Notch1及其下游关键分子HES1的表达情况;转染Notch1小干扰RNA(Notch1 siRNA)至小鼠PSCs后,利用Western blot检测α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤连蛋白(fibronectin)、I型胶原(collagen typeⅠ,ColⅠ)、Notch1及HES1的表达情况;利用划痕实验与CCK-8实验检测Notch1 siRNA对小鼠PSCs迁移与细胞活力的影响。结果:免疫组化与免疫荧光双标染色结果显示,Notch1表达在α-SMA阳性的PDAC间质细胞中;成功培养了小鼠PSCs细胞,且活化的PSCs中α-SMA、fibronectin和ColⅠ的表达升高,Notch1与HES1的表达均高于未活化的PSCs(P<0.01);转染Notch1 siRNA至小鼠PSCs后,细胞中α-SMA和ColⅠ的表达显著降低,而fibronectin和HES1的表达无显著改变;敲减活化的PSCs中Notch1的表达后,细胞的活力及迁移能力显著降低。结论:Notch1参与调节PSCs的活化,抑制Notch1的表达可抑制活化PSCs标志物α-SMA和ColⅠ的表达,降低PSCs的活化程度、活力及迁移能力,并且Notch1调节PSCs的活化不依赖经典的Notch信号通路。

• 单位
  基础医学院; 新乡医学院; 首都医科大学