CSNK1α1通过介导p53泛素化降解途径影响胆管癌细胞周期阻滞及凋亡水平的作用研究

作者：唐津天^*; 唐润娟; 易超; 黎旺红

来源：中国中西医结合消化杂志, 2022, 30(08): 558-564.

• 胆管癌
• 酪蛋白激酶1α1
• p53泛素化
• 细胞周期
• 凋亡

目的:探究酪蛋白激酶1α1(CSNK1α1)在胆管癌细胞中的表达水平及其对肿瘤细胞周期和凋亡的影响及机制。方法:采用qRT-PCR法和Western blot法检测人胆管癌细胞系QBC939、FRH0201、RBE与正常肝内胆管上皮细胞系HIBE中CSNK1α1的表达差异；将人胆管癌细胞系RBE随机分为对照组、sh-NC组、sh-CSNK1α1组，利用慢病毒感染RBE细胞，荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达，qRT-PCR法和Western blot法测定CSNK1α1表达，PI染色检测细胞各周期分布比例，流式细胞术和TUNEL染色观察细胞凋亡情况；RBE细胞转染sh-CSNK1α1慢病毒并给予蛋白酶体抑制剂MG132处理，Western blot测定细胞内p53途径相关蛋白表达，免疫共沉淀实验分析CSNK1α1与p53结合情况及p53泛素化水平。结果:与人正常肝内胆管上皮细胞系HIBE比较，胆管癌细胞系QBC939、FRH0201、RBE中CSNK1α1 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均上调(P<0.05);与对照组和sh-NC组比较，sh-CSNK1α1组细胞中CSNK1α1 mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均下调(P<0.05),出现G2/M期阻滞(P<0.05),细胞凋亡率和TUNEL阳性率均增加(P<0.05)。与对照组比较，sh-CSNK1α1组和MG132组细胞中p53、MDM2、p21及BAX的蛋白相对表达量均上调(P<0.05);与MG132组比较，sh-CSNK1α1+MG132组细胞中p53、MDM2、p21及BAX的蛋白相对表达量均进一步上调(P<0.05);CSNK1α1与p53能够形成复合物，且sh-CSNK1α1组细胞中p53蛋白泛素链明显低于对照组，p53蛋白表达则明显高于对照组。结论:CSNK1α1在人胆管癌细胞中高表达，靶向下调CSNK1α1能够使胆管癌细胞发生G2/M期阻滞，并促进细胞凋亡，该作用可能与其介导p53泛素化降解途径有关。

• 单位
  新疆医科大学第二附属医院; 新疆医科大学附属肿瘤医院