摘要

目的建立兔下颌骨前牙区种植修复动物实验模型,探讨转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β3联合体外培养的兔牙髓干细胞(dental pulp stem cells,DPSC)在兔种植体周围骨结合中的作用。方法将实验新西兰兔按随机数字表随机分为实验组、对照组和空白组,每组6只,在实验组的种植体与骨间隙内充填TGF-β3、DPSC、人工骨粉的混合物,在对照组的种植体与骨间隙内充填DPSC、人工骨粉的混合物,在空白组的种植体与骨间隙内充填磷酸盐缓冲液和人工骨粉的混合物。术后2周处死各组动物,观察游离下颌骨并对种植体周围骨组织进行HE染色和免疫组化染色,实时荧光定量PCR检测成骨相关基因的表达水平。结果种植体植入后均无脱落、松动。HE染色结果显示空白组可见种植体周围骨小梁稀疏,未见明显新骨形成,少量血管;对照组可见种植体周围骨小梁较稀疏、纤细,成骨细胞呈线状排列在骨小梁周围,少量新骨形成;实验组可见种植体周围骨小梁较多,其粗大且致密,成骨细胞呈密集成团排列、功能活跃被基质包裹,新骨形成较多,可观察到典型的骨陷窝、骨细胞并伴有大量新生血管。免疫组织化学结果显示实验组、对照组、空白组骨涎蛋白的平均阳性面积所占比例分别为(24.6±5.3)%、(11.3±2.8)%及(7.6±3.8)%。实验组骨涎蛋白呈强阳性表达,明显高于其他两组(P=0.000,P=0.000)。实时荧光定量PCR结果显示实验组RUNX相关转录因子2、Ⅰ型胶原、碱性磷酸酶基因的表达水平均高于空白组和对照组,且差异均有统计学意义(P=0.023)。结论 TGF-β3具有促进DPSC向成骨细胞转化的潜能,能增加成骨细胞的数量并促进种植体周围骨结合,为解决临床种植骨愈合时间过长等问题提供新思路。