摘要

目的:探讨人参皂苷辛酸酯(Rh2-O)能否诱导Huh-7肝癌细胞免疫原性细胞死亡及可能的机制。方法:体外培养Huh-7细胞,设置Rh2-O药物组、空白对照组及阳性对照组。采用CCK8法、流式细胞术分别检测细胞活力和细胞凋亡,ELISA及化学发光法分别检测细胞上清高迁移率族蛋白1(HMGB1)和三磷酸腺苷(ATP)的含量,免疫荧光法检测细胞钙网蛋白(CRT)的膜外翻,荧光探针DCFH-DA检测细胞内ROS水平,Western blot法检测细胞内质网应激信号通路相关蛋白的表达水平。结果:Rh2-O处理显著降低细胞活力、促进细胞凋亡(P <0.05),诱导细胞HMGB1的分泌、ATP的释放及CRT的膜外翻(P <0.05),使细胞内蓄积大量的ROS(P <0.05),提高内质网应激信号通路相关蛋白(PERK、eIF2α、p-eIF2α)的表达水平(P <0.05)。内质网应激抑制剂4-苯基丁酸(4-PBA)预处理后,可显著减弱由Rh2-O诱导的CRT膜外翻(P <0.05)。结论:Rh2-O可诱导肝癌细胞发生免疫原性细胞死亡,其机制可能与Rh2-O激活内质网应激促进细胞CRT膜外翻有关。

  • 单位
    公共卫生学院; 江西省预防医学重点实验室; 食品科学与技术国家重点实验室; 南昌大学