牛嵴病毒VP3蛋白的原核表达及初步应用

作者：王茜; 常继涛; 刘云; 于力

来源：中国预防兽医学报, 2012, (11): 907-910.

• 牛嵴病毒
• VP3蛋白
• 抗血清
• 间接ELISA bovine kobuvirus
• VP3 protein
• antiserum
• indirect ELISA

牛嵴病毒(BKV)是近几年在牛消化道中新发现的病毒,其致病性尚不清楚。我们的相关研究已表明,该病毒在我国的牛群中普遍存在。为重组表达BKV VP3蛋白,本研究采用RT-PCR方法从牛腹泻粪便样品中扩增BKV VP3蛋白的编码基因,将其克隆至pET-28a(+)载体中构建原核重组表达质粒pET-VP3。将pET-VP3转化至大肠杆菌BL21(DE3)中。经IPTG诱导表达及SDS-PAGE分析表明重组蛋白分子量约为27.8 ku,以包涵体形式存在。采用电洗脱方法纯化该重组蛋白并免疫BALB/c小鼠,制备抗BKV VP3的多克隆抗体。以纯化的重组蛋白作为包被抗原,初步建立了间接ELISA抗体检测方...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 东北农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室