环加氧酶2基因的原核表达、抗体制备及其在肝癌中的表达

作者：古春芳; 孟佳; 吴建国; 朱应

来源：武汉大学学报(理学版), 2006, (02): 197-201.

DOI：10.14188/j.1671-8836.2006.02.016

• 环加氧酶2(COX-2)
• 原核表达
• 抗体制备
• 肝癌 cyclooxygenase-2 gene
• prokaryotic expression
• antiserum preparation
• hepatocellular carcinoma

用PCR技术扩增环加氧酶2(COX-2)基因的C末端777 bp的片段,插入到pET-28b(+)中,构建原核表达载体.转入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导产生包涵体形式his-COX-2融合蛋白.用镍离子螯合柱(Ni-NTA)纯化融合蛋白,获得纯度较高的原核表达蛋白.纯化后的蛋白免疫家兔制备多克隆抗体,用ELISA及West-ern blotting分别检测抗体.用此抗体Western blotting检测肝癌组织中的环加氧酶2的表达.ELISA及Westernblotting结果显示免疫家兔所得的环加氧酶2抗体具有很高的效价,并能够特异性的识别真核细胞中的环加氧酶2.用此抗体检测...

• 单位
  武汉大学; 病毒学国家重点实验室; 生命科学学院