利用RTS500系统进行抗菌肽葛佬素蛋白的体外表达

作者：罗平; 许波; 鲁永玲; 周红

来源：中国临床药理学与治疗学, 2005, 10(06): 701-704.

DOI：10.3969/j.issn.1009-2501.2005.06.022

• 葛佬素
• 抗菌肽
• 快速翻译系统
• 体外表达
• PCR

目的:构建含目的基因葛佬素(gloverin)的重组子并通过体外快速翻译系统RTS500(rapidtranslationsystem)对其进行表达。方法:采用PCR方法扩增葛佬素cDNA,将其与表达载体pIVEX2.3连接;采用PCR及双酶切方法鉴定连接产物。将含目的基因片段的阳性重组质粒通过体外表达翻译系统RTS500,使其蛋白能在大肠杆菌(E.coli)裂解产物中进行表达。应用蛋白免疫印迹方法对表达产物进行鉴定。结果:pIVEX2.3G重组表达质粒通过体外表达翻译系统RTS500可表达出分子量约为14.4的蛋白;蛋白免疫印迹证实该蛋白为带有多聚组氨酸标签的融合蛋白。结论:抗菌肽葛佬素可在体外大肠杆菌裂解产物中进行表达。

• 单位
  第三军医大学