反义表皮生长因子受体RNA对U251胶质瘤细胞生长的抑制作用

作者：康春生; 浦佩玉; 张志勇; 王广秀; 贾志凡; 裘明哲; 原续波; 常津

来源：中华实验外科杂志, 2006, 23(1): 75-77.

DOI：10.3760/j.issn:1001-9030.2006.01.028

• 表皮生长因子
• 胶质瘤
• 基因治疗

目的探讨反义靶向表皮生长因子受体(EGFR)在体内外对U251细胞生长抑制作用.方法构建反义EGFR的pcDNA3表达质粒并进行了脂质体介导的U251人脑恶性胶质瘤细胞系基因转染.应用RT-PCR检测EGFR表达水平,应用MTT法、流式细胞术、Matrigel基质生长实验和Transwell方法评价肿瘤细胞转染前后的生物学行为.进一步应用裸鼠皮下荷瘤模型观察脂质体介导反义EGFR基因治疗对U251细胞生长抑制作用.对肿瘤组织应用免疫组织化学的方法进行EGFR、PCNA和GFAP表达比较.结果脂质体介导反义EGFR可显著抑制U251细胞ECFR表达,MTT法分析显示反义EGFR转染组胞生长抑制率为68%;与对照组和pcDNA3转染组比较,细胞周期分析结果表明p-anti-hEGFR转染组G0～G1期细胞数没有明显变化,进入S期的细胞数较对照组减少了,而进入G2期细胞则增加.Matrigel基质生长实验显示对照组和pcDNA3转染组细胞呈正常形态贴壁生长,而p-anti-hEGFR转染组细胞不能贴壁生长,呈团块状簇集生长.Transwell方法显示肿瘤细胞的体外侵袭能力显著下降.裸鼠皮下荷瘤模型实验显示反义EGFRRNA可以显著抑制皮下肿瘤生长,组织病理学分析显示治疗组EGFR表达下降而GFAP表达上调.结论反义EGFR可以显著抑制U251细胞的EGFR表达,在体内外对U251细胞生长均产生明显抑制作用.

• 单位
  天津大学; 天津医科大学总医院