高分辨溶解曲线技术鉴定常见致病分枝杆菌研究

作者：梁雪妮; 丁进亚; **; 孟冬娅; 何莉

来源：华南国防医学杂志, 2016, 30(08): 489-495.

DOI：10.13730/j.issn.1009-2595.2016.08.001

• 分枝杆菌
• 高分辨溶解曲线
• 基因芯片
• 快速鉴定

目的建立快速、准确鉴定临床常见分枝杆菌菌种的聚合酶链高分辨溶解曲线(polymerase chain reaction high resolution melting,PCR-HRM)分析方法,为临床分枝杆菌感染的早期诊断和治疗提供新帮助。方法收集传统罗氏培养法的81株分枝杆菌。以16S-23S rRNA内转录间隔区(internal transcribed spacer,ITS)为靶基因合成引物,建立PCR-HRM方法。以测序结果为金标准,将PCR-HRM法和传统罗氏培养法鉴定的结果进行对比。结果 81株分枝杆菌中,PCR-HRM法和罗氏培养法的正确鉴定率分别为100%、95.1%,PCR-HRM法和罗氏培养法的正确鉴定率无统计学差异(P>0.05)。两种方法检测结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)的符合率均为100%,PCR-HRM方法检测非结核分枝杆菌(nontuberculosis mycobacteria,NTM)的符合率为100%,罗氏培养法检测NTM的符合率为92.9%。结论初步建立了分枝杆菌PCR-HRM鉴定方法,该方法可准确鉴定常见的MTB和NTM,可能成为临床分枝杆菌感染的快速鉴定方法。

• 单位
  北京博奥晶典生物技术有限公司; 辽宁省金秋医院; 沈阳军区总医院; 中国人民解放军广州军区武汉总医院