红鳍东方鲀精原干细胞鉴定、分离及纯化

作者：任玉芹; 周勤^*; 孙朝徽; 宋立民; 于清海; 姜秀凤; 王玉芬; 王青林

来源：水生生物学报, 2019, 43(04): 797-804.

• 红鳍东方鲀
• 精原干细胞
• Percoll
• 免疫荧光

为获得高比例精原干细胞,开展了不同月龄红鳍东方鲀精原干细胞分离纯化研究。采用组合酶消化法制备不同月龄的精巢单细胞悬液,通过形态学观察和生殖细胞特异基因vasa免疫荧光鉴别精原干细胞,Percoll不连续梯度(10%、30%和50%)纯化精原干细胞。结果显示:14月龄雄鱼精巢生殖细胞主要为A型精原细胞,精原干细胞占比极显著性地高于22月龄(P<0.05)。纯化后精原干细胞主要分布在10%—30%Percoll梯度带中, 14月龄雄鱼生殖细胞主要分布在此层,且纯化后精原干细胞占比远高于纯化前以及22月龄纯化前后。结果表明, 14月龄更适用组合酶消化分离,并通过Percoll梯度离心法获得高比例的红鳍东方鲀精原干细胞。

• 单位
  中国水产科学研究院