鸡MHC Ⅰ类分子的多抗制备及其在不同MD抗性MHC单倍型鸡脾脏中的差异表达

作者：高彩霞; 李行; 杨柳; 武永淑; 蔡文博; 张伟; 韩建林; 韩凌霞

来源：免疫学杂志, 2012, (02): 93-97+103.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20120021

• MHC Ⅰ类蛋白
• 兔多抗血清
• 蛋白差异表达 MHC class Ⅰ protein
• Polyclonal antibody
• Differential expression

目的制备能检测不同MHC-B单倍型MHC I类蛋白的多抗血清,并对马立克氏病(MD)抗性较强的BW/G3系鸡群(MHC B2单倍型)和敏感性较强的BW/G7系鸡群(B19单倍型)接种马立克氏病毒(MDV)后,利用Western blot技术半定量分析MHC I类蛋白表达量的差异。方法从BW/G3系鸡脾组织cDNA中PCR扩增BF基因的保守序列第4～8外显子,克隆入原核表达载体pET-30a,构建重组质粒。转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导获得表达,经SDS-PAGE初步纯化,免疫新西兰兔,制备兔抗血清。以高效价的兔抗血清为一抗,对BW/G3和BW/G7系健康鸡和MDV攻毒后11周的...

• 单位
  中国农业科学院北京畜牧兽医研究所; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 甘肃农业大学; 兽医生物技术国家重点实验室