氯化两面针碱对类泛素化修饰抑制剂MLN4924介导肺癌耐药的作用与机制研究

作者：李蒙; 张荔; 赵伟丽; 李立辉^*

来源：上海中医药大学学报, 2023, 37(04): 22-101.

DOI：10.16306/j.1008-861x.2023.04.003

• 氯化两面针碱
• MLN4924
• 耐药
• 泛素连接酶复合体

目的：探索中药药效物质氯化两面针碱对A549 MLN4924耐药肺癌细胞株的影响及作用机制。方法：利用MLN4924低剂量处理A549细胞6个月，并进行细胞半数抑制率(IC50)分析和Western blot检测以确保顺利诱导出MLN4924耐药细胞株(A549-MR)；氯化两面针碱浓度梯度和时间梯度处理A549-MR，并进行ATPLite细胞增殖分析、细胞计数检测其对A549-MR生长的影响；同时收集A549-MR细胞总蛋白进行Western blot检测氯化两面针碱抑制A549-MR生长的分子机制。结果：IC50分析和Western blot实验显示，经低剂量长时间处理A549细胞后，MLN4924对A549细胞的IC50从0.355μmol/L提高至10.643μmol/L，且其不能显著抑制Cullins家族蛋白的类泛素化修饰(neddylation)；细胞增殖分析显示，氯化两面针碱显著抑制MLN4924耐药肺癌细胞生长；Western blot结果显示，氯化两面针碱能下调A540-MR细胞内的Cullins蛋白表达并引起其抑癌底物蛋白p21、p27等积聚。结论：氯化两面针碱通过抑制泛素连接酶(CRLs)复合体的活性，导致其下游抑癌蛋白底物积聚，从而抑制neddylation抑制剂MLN4924引起的肺癌耐药细胞增殖。

• 单位
  上海中医药大学附属龙华医院