连翘酯苷A抑制四氯化碳诱导小鼠肝纤维化及其机制的研究

作者：郭茜; 张奕; **林; 陆宾^*; 季莉莉

来源：中国中药杂志, 2022, 47(22): 6137-6145.

DOI：10.19540/j.cnki.cjcmm.20220725.401

• CCl4
• 连翘酯苷A
• 肝纤维化
• 肝星状细胞
• 内皮-间充质转化

该研究旨在探讨连翘酯苷A(forsythiaside A, FTA)改善四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)诱导小鼠肝纤维化的药效及其机制。通过血清谷丙/谷草转氨酶(alanine/aspartate aminotransferase, ALT/AST)活力检测，肝组织羟脯氨酸(hydroxyproline, HYP)含量测定和Ⅰ型胶原α1 (collagenⅠalpha 1, Col1a1)、Ⅲ型胶原α1 (collagenⅢalpha 1, Col3a1)基因表达的检测，并进行肝组织苏木精-伊红(hematoxylin-eosin, HE)染色、马松三色(Masson′s trichrome, Masson)染色和天狼星红(Sirius red)染色评价FTA对CCl4诱导小鼠肝纤维化的改善作用；采用qPCR检测肝组织和肝星状细胞(hepatic stellate cells, HSC)中α-平滑肌肌动蛋白(actin alpha 2/α-smooth muscle actin, Acta2/α-SMA)、转化生长因子β(transforming growth factor β, Tgfβ)等基因的表达，并采用Western blot检测肝组织和HSC中α-SMA蛋白的表达，评价FTA对HSC活化的抑制作用；采用Western blot检测肝组织血管富集部位中α-SMA、波形蛋白(vimentin, Vim)、血管内皮钙黏蛋白(vascular endothelial cadherin, Ve-cadherin)与血小板-内皮细胞黏附分子(platelet endothelial cell adhesion molecule-1, PECAM-1/CD31)蛋白的表达，评价FTA对血管内皮-间充质转化(endothelial-mesenchymal transition, EMT)的逆转作用。结果显示，与模型组相比，FTA能明显地降低CCl4造成的肝细胞坏死、肝脏中的炎性细胞浸润和胶原沉积，表明FTA具有改善肝纤维化的药效。FTA可以降低肝脏组织中Acta2、Tgfβ、Col1a1、Col3a1基因的表达，减少HSC中升高的α-SMA蛋白表达；FTA还可以逆转肝组织血管富集部位中升高的Vim、α-SMA和降低的Ve-cadherin、CD31蛋白表达。上述结果表明，FTA可能通过抑制HSC活化和逆转EMT发挥抗肝纤维化的药效。

• 单位
  中药标准化教育部重点实验室; 上海中医药大学