毛兰素通过MAPK途径抑制葡萄膜黑色素瘤增殖并诱导凋亡

作者：查桂平; 汪卓琼

来源：中国现代医生, 2019, 57(22): 31-169.

• 毛兰素
• p21
• MAPK途径
• 葡萄膜黑色素瘤
• 细胞凋亡

目的研究毛兰素对葡萄膜黑色素瘤细胞株增殖和凋亡的影响,以及探索潜在的信号通路。方法采用MTT比色法检测毛兰素对MUM-2B和C918葡萄膜黑色素瘤细胞株增殖活力的影响,DAPI染色结合AnnexinV/PI双染后流式细胞分析检测葡萄膜黑色素瘤细胞凋亡率,免疫印迹分析细胞增殖相关蛋白如p21、MAPK及其磷酸化形式,凋亡相关蛋白Caspase-3和PARP等的表达量。结果毛兰素对C918、MUM-2B葡萄膜黑色素瘤细胞均存在不同程度的抑制作用。当浓度达到25μmol/L时,MUM-2B的抑制率达到(79.92±2.79)%,C918的抑制率在(84.60±0.81)%。DAPI染色可见细胞数量随毛兰素浓度增加而逐渐减少,而且存在细胞凋亡现象。随着毛兰素作用浓度的增大,G2/M期细胞的比例逐渐增加,早期和晚期凋亡细胞比例增加。在毛兰素处理后,p38 MAPK蛋白表达在MUM-2B中较为显著的下调,PARP总蛋白水平有显著下调(P<0.05),p38 MAPK总蛋白有一定程度的下调,而p21、PARP活化形式(cl-PARP)和Caspase-3的活化形式(cl-Caspase3)显著上调(P<0.05)。结论毛兰素能够有效抑制葡萄膜黑色素瘤细胞C918、MUM-2B、增殖,阻滞细胞周期,促进葡萄膜黑色素瘤细胞凋亡,且其作用效果呈现出一定范围内的剂量依赖性。其作用机制与上调p21表达,抑制p38 MAPK表达有关,后者可削弱MAPK信号通路活化,并可活化细胞凋亡途径关键蛋白Caspase-3诱导凋亡。

• 单位
  宁波市鄞州人民医院; 宁波大学