摘要
克隆验证茶树肉桂酸-4-羟基化酶(cinnamate 4-hydroxylase,C4H)基因并预测C4H基因的生物学功能。提取茶树新鲜叶片总RNA,利用逆转录-聚合酶链反应克隆出茶树C4H基因,利用生物信息学软件分析C4H基因编码蛋白质的保守结构域、理化性质、亚细胞定位、跨膜域和信号肽、同源性、系统进化等。结果表明:茶树C4H基因包含一个1518 bp的完整开放阅读框(open reading frame,ORF),编码505个氨基酸;保守结构域分析显示,茶树C4H基因编码的蛋白包含一个p450超家族蛋白的结构域(PLN02394),分子量为58.16 kDa,理论等电点为9.29,为亲水性的不稳定蛋白质,定位在内质网,无信号肽,不含有跨膜结构域,以α-螺旋和无规则卷曲为主构成其蛋白二级结构,C4H基因在氨基酸水平与油茶树同源性最高(92%)。本研究成功克隆了茶树C4H基因,分析了其生物学功能,为进一步深入研究C4H基因的功能及茶树合成的分子机理奠定了初步的理论基础。
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单位黄山小罐茶业有限公司; 合肥海关技术中心