基于核酸自动提取仪的FQ-PCR法在人巨细胞病毒核酸定量检测中的临床应用

作者：刘林娜; 章婷婷; 余坚; 陈向南; 陈占国^*

来源：中国卫生检验杂志, 2018, 28(22): 2712-2717.

• 核酸自动提取仪
• 巨细胞病毒
• 荧光定量PCR
• 性能评价

目的评价基于核酸自动提取仪的实时荧光PCR(FQ-PCR)法在人巨细胞病毒(HCMV)核酸定量检测中的性能。方法取高浓度值的HCMV标准品进行梯度稀释,评价灵敏度;取低值、中值、高值标准品评价精密度;取高浓度的HCMV抗凝血浆梯度稀释验证线性范围;使用HCMV DNA阴性抗凝血浆稀释标准品至最低灵敏度浓度500 copy/ml,验证最低检出限;取高浓度血浆样本和生理盐水,进行交叉污染验证试验。分别用核酸自动提取仪与手工法提取50份血浆标本的HCMV核酸,评价两方法的线性关系。结果灵敏度方面,呈良好的线性关系(r=0. 998)。精密度方面,3个样本的重复性实验CV值均<5%。线性范围验证显示在5. 0×102copy/ml～5. 0×107copy/ml时呈现良好的线性关系(r=0. 991,P <0. 05)。实验不存在交叉污染情况。2种核酸提取方法具有良好的相关性。结论基于安普利Anadas9850全自动核酸提取仪的FQ-PCR法在HCMV核酸定量检测中性能良好,能够较好地满足临床检测需求。

• 单位
  温州医科大学附属第二医院