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摘要
目的：探讨蛋白质精氨酸甲基转移酶1(protein arginine methyltransferase 1,PRMT1)通过沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)/过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(peroxisome proliferator-activated receptor γ coactivator-1α,PGC-1α)信号通路对2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus,T2DM）小鼠肠屏障功能损伤的作用。方法：20只8周龄SPF级C57BL/6小鼠随机分为对照组（n=5）和实验组（n=15）；将采用链脲佐菌素和高脂饮食构建T2DM小鼠模型的实验组，随机分为T2DM组、T2DM+PRMT1抑制剂AMI-1(arginine methyltransferase inhibitor 1)组和T2DM+白藜芦醇（resveratrol,Resv）组，每组5只。将对数生长期的人结肠上皮NCM-460细胞分为对照组、高糖（HG;50 mmol/L葡萄糖）组、HG+AMI-1组和HG+Resv组。采用PRMT1小干扰RNA(PRMT1-siRNA)和正常对照siRNA(non-targeting siRNA,NT-siRNA)转染NCM-460细胞后，HG处理48 h，分为NT-siRNA组、NT-siRNA+HG组、PRMT1-siRNA组和PRMT1-siRNA+HG组。采用口服葡萄糖耐量试验检测血糖；总胆固醇（total cholesterol,TC）和甘油三酯（triglyceride,TG）测定试剂盒（COD-PAP法和GPO-PAP法）以及高密度脂蛋白胆固醇（high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C）检测试剂盒（微板法）检测血清TC、TG和HDL-C水平；异硫氰酸荧光素（fluorescein isothiocyanate,FITC）-葡聚糖法检测肠道通透性；Western blot法检测结肠组织和NCM-460细胞PRMT1、SIRT1、PGC-1α、ZO-1(zonula occludens-1)和occludin的表达。结果：与正常对照组相比，T2DM组模型小鼠血清葡萄糖、TG和TC水平升高，HDL-C水平降低，血清FITC-葡聚糖水平升高，结肠组织中PRMT1蛋白表达升高，SIRT1和PGC-1α及ZO-1蛋白表达均下降（P<0.05）；与T2DM组模型小鼠相比，T2DM+AMI-1和T2DM+Resv组中小鼠的结肠长度均增加，血清FITC-葡聚糖水平降低，结肠组织中PRMT1蛋白表达降低，ZO-1、occludin和SIRT1及PGC-1α蛋白表达上升（P<0.05）。与对照组相比，HG处理后NCM-460细胞中PRMT1蛋白表达升高，SIRT1、PGC-1α和ZO-1及occludin蛋白表达下降（P<0.05）；与HG组相比，HG+AMI-1组和HG+Resv组细胞中PRMT1蛋白表达降低，SIRT1、PGC-1α和ZO-1及occludin蛋白表达升高（P<0.05）；与NT-siRNA组相比，NT-siRNA+HG组NCM-460细胞的PRMT1蛋白表达上升，SIRT1、PGC-1α和ZO-1及occludin蛋白表达均显著降低（P<0.05）；与PRMT1-siRNA组相比，PRMT1-siRNA+HG组的SIRT1、PGC-1α和ZO-1及occludin蛋白表达并未发生改变。结论：PRMT1可能通过抑制SIRT1/PGC-1α信号通路损伤T2DM小鼠肠屏障功能。
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