摘要
目的探讨程序性细胞死亡因子5(PDCD5)在卵巢子宫内膜异位症组织中的表达及PDCD5对异位内膜间质细胞生物学行为的影响。方法应用免疫组织化学法、实时定量逆转录酶链式反应法检测PDCD5在正常内膜、卵巢子宫内膜异位症患者异位内膜及在位内膜中的蛋白和mRNA表达水平。进一步分离培养异位内膜间质细胞,采用小干扰RNA敲降PDCD5,分别通过CCK-8法和TUNEL法检测在不同浓度亮丙瑞林作用下异位内膜细胞的增殖和凋亡情况。采用χ2检验比较异位、在位和正常内膜的PDCD5蛋白阳性表达率的差异,异位、在位及正常内膜组织中PDCD5 mRNA相对表达量的两两比较及不同浓度下PDCD5敲降组和对照组的不同时间的活细胞计数、不同浓度亮丙瑞林作用下细胞增殖抑制率以及凋亡率的比较采用t检验。结果异位内膜、在位内膜及正常内膜组织中PDCD5蛋白的阳性表达率分别为30%、29%及75%,异位内膜和在位内膜的PDCD5蛋白表达均低于正常内膜,差异均具有统计学意义(χ2=8.120、7.201;P=0.004、0.007)),异位内膜和在位内膜的PDCD5蛋白表达比较,差异无统计学意义(P=0.928)。异位内膜、在位内膜及正常内膜组织中PDCD5 mRNA相对表达量分别为0.24±0.02,0.27±0.03及1.00±0.04,异位内膜和在位内膜的PDCD5 mRNA表达均明显低于正常内膜,差异具有统计学意义(t=-32.098,P <0.001;t=-28.659,P <0.001),异位内膜和在位内膜的PDCD5 mRNA表达比较,差异无统计学意义(t=-1.617,P=0.181)。PDCD5 mRNA表达与蛋白表达水平一致。体外单纯敲降PDCD5对异位内膜间质细胞形态及增殖无明显影响。CCK-8法结果表明,随着亮丙瑞林浓度增加,PDCD5敲降组和对照组的细胞增殖抑制率均逐渐增加,不同浓度下PDCD5敲降组的细胞增殖抑制率明显低于对照组,差异均具有统计学意义(P <0.05)。TUNEL法结果表明,在0.1μg/ml亮丙瑞林作用下,PDCD5敲降组的细胞凋亡率(0.06±0.01)低于对照组(0.13±0.02),差异具有统计学意义(t=-5.972,P <0.001)。结论 PDCD5敲降能够减弱异位内膜间质细胞对亮丙瑞林的敏感性,使细胞凋亡减少,增殖增加。PDCD5在卵巢子宫内膜异位症组织中表达下调可能促进了子宫内膜异位症的发生发展。
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