本发明提供了一种新型生物防腐保鲜剂,其包含特氏丙酸杆菌代谢物70~80%,乳酸链球菌素20~30%。本发明还提供了所述防腐保鲜剂的制备方法及其应用。本发明防腐保鲜剂中的特氏丙酸杆菌抗菌代谢物可用于抑制革兰氏阴性菌、霉菌和酵母,乳酸链球菌素可抑制革兰氏阳性菌。本发明防腐保鲜剂对人体安全无害、广谱抗菌防腐效果好,并且制备方法简易、成本较低,其应用前景广泛。