摘要
目的观察柯萨奇B组病毒3型衣壳蛋白1(CVB3-VP1)特征性小干扰RNA(smallinterferingRNA,siRNA)对CVB3复制及VP1蛋白表达的抑制作用。方法根据CVB3VP1基因的序列及其结构特征,设计并用化学方法合成小干扰RNA(siRNA)。以CVB3感染HeLa细胞,通过脂质体介导以siRNA转染HeLa细胞。48h后,观察细胞病变的程度,用TCID50法测定病毒滴度,免疫荧光法测定CVB3-VP1蛋白的表达,RT-PCR法检测CVB3-RNA的水平。结果化学合成的4对针对CVB3-VP1的siRNA,发现其中有两对(VP1-1、VP1-2)对CVB3的复制具有明显的抑制作用,同时VP1蛋白的表达明显减少;细胞病变的程度也明显减轻。结论CVB3-VP1siRNA可有效地抑制CVB3在HeLa细胞中的复制及表达VP1。
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