两个不同启动子及其组合对碱性蛋白酶AprE异源表达的影响

作者：史超硕; 李登科; 曹雪; 袁航; 张钰文; 于江悦; 路福平; 李玉^*

来源：中国生物工程杂志, 2019, 39(10): 17-23.

DOI：10.13523/j.cb.20191003

• 启动子
• 碱性蛋白酶
• 异源表达
• 酶活力

背景:碱性蛋白酶(alkaline protease)是一种具有广泛用途的工业酶制剂,其发酵活力目前仍不能满足工业生产需要。目的:旨在通过优化启动子及其组合来提高Bacillus subtilis WB600中碱性蛋白酶AprE的产量。方法:以Bacillus subtilis WB600为出发菌株,成功构建了含有4种不同类型启动子(P1、P2、P-1-2、P-2-1)的碱性蛋白酶AprE表达菌株。结果:含不同启动子的4株重组菌均可成功表达碱性蛋白酶,发酵48h,含单一启动子P2的重组菌株表达碱性蛋白酶的活力为4 041U/ml,是P1的1. 23倍。双启动子重组菌B. subtilis WB600/P-2-1-aprE表达的酶活性最高,是双启动子P-1-2的1. 35倍,达到了6 125U/ml。结论:为工业化高产碱性蛋白酶提供了一种有效策略。

• 单位
  天津科技大学; 工业发酵微生物教育部重点实验室; 生物工程学院