立氏立克次体蛋白抗原基因的表达和重组蛋白抗原的免疫印迹分析

作者：**平; 王颖; 王锡乐; 陈梅玲; 温博海

来源：中国人兽共患病学报, 2009, (10): 931-934+939.

• 立氏立克次体
• 抗原相关基因
• 重组蛋白
• 免疫印迹 Rickettsia rickettsii
• antigen-associated gene
• recombinant protein
• immunoblot assay

目的表达立氏立克次体(Rickettsia rickettsii)主要抗原基因,免疫印迹初步分析重组蛋白抗原的抗原性。方法根据立氏立克次体全基因组序列选出主要抗原相关基因,采用PCR从全基因组中扩增抗原相关基因,将扩得的基因片段插入原核表达质粒构建抗原基因重组表达质粒,将重组质粒转化大肠杆菌并诱导转化菌表达重组蛋白抗原。采用立氏立克次体感染的豚鼠血清和斑点热患者血清分别与纯化的重组蛋白抗原做免疫印迹分析。结果经PCR扩增后获得43个目的基因片段,其中36个基因片段在大肠杆菌中高效表达重组蛋白抗原,其中5个蛋白抗原在免疫印迹中与感染豚鼠血清和斑点热患者血清反应均为阳性。结论免疫印迹筛选出5种立氏...

• 单位
  军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室