蛋白激酶B抑制剂对肝癌组织中肿瘤浸润淋巴细胞生物学活性的影响

作者：徐本玲; 周进学; 袁龙; 高全立; 李铁鹏; 付晓敏; 陈广玉; 杜雪相

来源：中华实用诊断与治疗杂志, 2018, 32(03): 241-244.

DOI：10.13507/j.issn.1674-3474.2018.03.010

• 肝癌
• 肿瘤浸润淋巴细胞
• 蛋白激酶B抑制剂
• 中央记忆型T细胞

目的探讨蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)抑制剂对肝癌组织中肿瘤浸润淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)生物学活性的影响。方法肝癌患者4例,取其手术切除肿瘤组织标本密度梯度离心法分离TIL,并分为白细胞介素(interleukin,IL)-2组(6 000u/mL IL-2)和Akt抑制剂组(1mmol/L Akt抑制剂+6 000u/mL IL-2),培养第10天,2组均加入抗CD3抗体,继续原培养液培养20d。依据细胞增殖倍数绘制生长曲线检测TIL增殖活性;流式细胞法检测2组T淋巴细胞亚型及TIL分泌干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的能力;ELISA法检测TIL培养上清液中IFN-γ、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)及IL-10水平。结果 Akt抑制剂组与IL-2组TIL数目在抗CD3抗体刺激前(培养第5、10天)、刺激后(培养第15、20、25、30天)比较差异均无统计学意义(P>0.05);培养第5、10、15、20、25、30天,Akt抑制剂组中央记忆型T细胞占CD8+T淋巴细胞比率[(9.57±9.14)%、(13.98±3.92)%、(15.74±2.74)%、(16.05±2.36)%、(19.14±3.55)%、(14.33±3.66)%]均明显高于IL-2组[(9.14±3.06)%、(10.07±3.57)%、(11.10±3.32)%、(11.72±2.87)%、(12.80±4.20)%、(9.61±4.23)%](P<0.05);培养第25天,中央记忆型T细胞占CD8+T细胞比率在Akt抑制剂组、IL-2组均最高;随培养时间延长,2组TIL上清中IL-10、IFN-γ、TNF-α分泌量均逐渐升高,且Akt抑制剂组IFN-γ分泌量自第5天开始明显高于IL-2组(P<0.05),TNF-α分泌量在第25天明显高于IL-2组(P<0.05),2组不同时间IL-10分泌量比较差异均无统计学意义(P>0.05);流式细胞法检测结果显示,培养第25天,Akt抑制剂组分泌IFN-γ的TIL比率[(11.35±0.47)%]明显高于IL-2组[(6.25±0.66)%](P<0.05)。结论 Akt抑制剂可提高肝癌组织TIL中中央记忆型T细胞比率,促进TIL分泌IFN-γ,且不影响TIL增殖活性。

• 单位
  郑州大学; 河南省肿瘤医院